难点
怎么给人体最大细胞“脱水”?
冷冻精子的技术很成熟,应用也较广泛。而冷冻卵子在我国的推广难点,除了政策上不支持普通人操作外,关键还是技术层面的问题,也就是近几年才解决的快速冷冻、解冻成功率问题。
广州医科大学第三附属医院生殖助孕中心负责卵子冷冻计划的杜红姿主任表示,卵子作为人体最大的体细胞,构成卵子细胞的主要成分中,除了各类生命物质,最主要的就是水,它们在冷冻卵子的过程中,成了最需要克服的瓶颈。
“卵子细胞内的水分过多,冷冻过程中,水由液体变成固体的过程中,会形成棱角分明的冰晶。这些细微的棱角,极可能成为破坏卵子细胞中物质的元凶。”杜红姿表示,细胞里的水分过少也不行,失去水分的支持,虽然便于保存,但细胞就会完全死掉。
冷冻卵子的技术由来已久,最早是为了满足畜牧业对珍稀动物的保护和配种用途,上世纪60-70年代开始研究。但它真正第一次应用于人工辅助生殖技术,也就是1986年的事情。当时澳大利亚专家第一次复苏了冷冻卵子,并成功形成胚胎、受孕,最后诞生了第一个被称为“冰宝宝”(又被称为“时光婴儿”)的通过冰冻卵子孕育的试管婴儿。但当时的专家发现,冻卵的复苏率很低,做试管婴儿时的成功率也远低于新鲜卵子。直到发明了快速脱水和极速冷冻方法,这个问题才得到有效解决。
冷冻:用试剂控制脱水过程 1秒钟降到零下196℃
中学生物课都做过这样的实验:将一株植物放置在浓度很高的盐水中,植物会慢慢枯萎。盐水和植物自身水分之间存在的渗透压,会让植物水分突破细胞壁,向外环境逃逸。
动物细胞虽然只有细胞膜,但也存在类似的渗透压。正是基于这样的原理,生殖医生可以对卵子进行脱水冷冻。先将其放置到细胞培养液和专业器皿中30分钟左右,随后一种15毫升装、售价2800元的脱水试剂“上场”。这种试剂主要是乙二醇、二甲基亚砜类物质,已被证实在脱水过程中对卵子细胞的安全危害性极小。
先用浓度低、渗透压低的试剂,卵子细胞开始快速脱水;再上浓度高、渗透压力高的试剂,让脱水过程可控,保留一定水分。随后,在1秒钟内让脱水后的卵子由室温降低到零下196℃。细胞内的液体不再是冰晶,而是玻璃化的固态物质,对卵子细胞的损害也就降到了较低水平。
复活:给卵细胞“注水”在模拟人体环境待4小时
而让冷冻卵子快速复活的过程,则是将上述昂贵试剂的浓度由高向低进行反向操作。为保证水分缓慢进入解冻后的卵细胞,高渗透压、高浓度的解冻试剂先上,让外部环境的洁净水分、培养液慢慢进入卵细胞中。接着上浓度稍低的试剂,又渗透进一些水分、培养液;当第四组渗透压和浓度均为最低的试剂“上场”时,给卵细胞“注水”的过程也就完成了。
随后,生殖医学专家还会将这些复苏的卵子,放置在37℃、二氧化碳浓度6%、湿度95%以上的培养液中待上4个小时。在模拟出来的人体环境待上足够长时间后,感觉回到熟悉环境的卵子细胞才终于“满血复活”。之后,能否成功与精子完成结合,分娩出试管婴儿,就要看胚胎质量、生殖系统状况等因素了。
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